sábado, 24 de septiembre de 2011

sábado, 3 de septiembre de 2011

Transporte activo a través de la membrana celular

En la mayor parte de los casos este transporte activo se realiza a expensas de un gradiente de H+  previamente creado a ambos lados de la membrana, por procesos de respiración y fotosíntesis. Los sistemas de transporte activo son los más abundantes entre las bacterias, y se han seleccionado evolutivamente debido a que en sus medios naturales la mayoría de los procariotas se encuentran de forma permanente o transitoria con una baja concentración de nutrientes.
El transporte activo de moléculas a través de la membrana celular se realiza en dirección ascendente o en contra de un gradiente de concentración (Gradiente químico) o en contra un gradiente eléctrico de presión en otras palabras es el paso de sustancias desde un medio poco concentrado a un medio muy concentrado.
Para desplazar estas sustancias contra corriente es necesario el aporte de energía procedente del ATP.
Las proteínas portadoras del transporte activo poseen actividad ATPasa para formar ADP o AMP.


Transporte activo primario: Bomba de sodio y potasio


Transporte activo primario: en este caso, la energía derivada del ATP directamente empuja a la sustancia para que cruce la membrana, modificando la forma de las proteínas de transporte (bomba) de la membrana plasmática. El ejemplo más característico es la bomba de Na+/K+, que mantiene una baja concentración de Na+ en el citosol extrayéndolo de la célula en contra de un gradiente de concentración. También mueve los iones K+ desde el exterior hasta el interior de la célula pese a que la concentración intracelular de potasio es superior a la extracelular. Esta bomba debe funcionar constantemente ya que hay pérdidas de K+ y entradas de Na+ por los poros acuosos de la membrana. 
Esta bomba actúa como una enzima que rompe la molécula de ATP y también se llama bomba Na+/K+-ATPasa. Todas las células poseen cientos de estas bombas por cada um2 de membrana.








Transporte activo secundario o cotransporte

Es el transporte de sustancias que normalmente no atraviesan la membrana celular tales como los aminoácidos y la glucosa, cuya energía requerida para el transporte deriva del gradiente de concentración de los iones sodio de la membrana celular
Intercambiador calcio-sodio: Es una proteína de la membrana celular de todas las células eucariotas. Su función consiste en transportar calcio iónico (Ca2+) hacia el exterior de la célula empleando para ello el gradiente de sodio; su finalidad es mantener la baja concentración de Ca2+ en el citoplasma que es unas diez mil veces menor que en el medio externo. Por cada catión Ca2+ expulsado por el intercambiador al medio extracelular penetran tres cationes Na+ al interior celular. Se sabe que las variaciones en la concentración intracelular del Ca2+ (segundo mensajero) se producen como respuesta a diversos estímulos y están involucradas en procesos como la contracción muscular, la expresión genética, la diferenciación celular, la secreción, y varias funciones de las neuronas.Si el aumento de la concentración de Ca2+ en la fase acuosa del citoplasma se aproxima a un décimo de la del medio externo, el trastorno metabólico producido conduce a la muerte celular.





sábado, 20 de agosto de 2011

Técnicas de tinción


Tinción de GRAM:

Materiales:
Mechero, Asa, Desinfectante, MicroscopioLaminilla y cubre-objeto, Bandeja para hacer tinción, Tinte cristal violet,   Iodo. Grams iodine,   Alcohol o descolonizaste,  Safranina,  Agua


La tinción de Gram es uno de los métodos de tinción más importantes en el laboratorio bacteriológico. Su utilidad práctica es indiscutible y en el trabajo microscópico de rutina del Laboratorio de Microbiología las referencias a la morfología celular bacteriana, se basan justamente en la tinción de GRAM. La secuencia de la tinción es la siguiente: el Frotis fijado con calor se tiñe 1 min con Violeta Cristal, se lava con agua, se cubre con solución Yodada durante 1 min y se lava de nuevo con agua, decolorar con mezcla alcohol etílico/acetona. Escurrir y cubrir con Safranina (color de contraste) durante 20 seg. Lavar y secar.
Esta tinción se denominada así por el bacteriólogo danés Christian Gram; Sobre la base de su reacción a la tinción de Gram, las bacterias pueden dividirse en dos grupos, grampositivas y gramnegativas. Las bacterias gram-positivas y gram-negativas tiñen de forma distinta debido a las diferencias constitutivas en la estructura de sus paredes celulares. Debido a su importancia en taxonomía bacteriana y a que indica diferencias fundamentales de la pared celular de las distintas bacterias.
Las células fijadas al calor sobre un portaobjetos se tiñen, primero con una solución de cristal violeta y son lavadas después para quitar el exceso de colorante. En este estado, todas las células, tanto las grampositivas como las gramnegativas, están teñidas de azul.

El portaobjetos se cubre entonces con una solución de yodo-yoduro potásico.El I2 entra en las células y forma un complejo insoluble en agua con el cristal violeta.
Se lleva a cabo después la decoloración, usando una mezcla de alcohol-acetona, sustancias en las que es soluble el complejo I2-cristal violeta. Algunos organismos (grampositivos) no se decoloran, mientras que otros (gramnegativos) lo hacen. 
La diferencia esencial entre esos dos tipos de células está por tanto en su resistencia a la decoloración; esta resistencia se debe probablemente al hecho de que en el caso de bacterias gram-negativas, la mezcla de alcohol/acetona es un solvente lipídico y disuelve la membrana exterior de la pared de la célula. Las células grampositivas, a causa de sus paredes celulares más espesas. no son permeables al disolvente ya que éste deshidrata la pared celular y cierra los poros, disminuyendo así el espacio entre las moléculas y provocando que el de complejo cristal violeta-yodo quede atrapado dentro de la pared celular. Después de la decoloración las células grampositivas son todavía azules, pero las gramnegativas son incoloras.
Para poner de manifiesto las células gramnegativas se utiliza un colorante de color rojo, como la safranina o la fucsina básica. Después de la coloración de contraste las células gramnegativas son rojas, mientras que las grampositivas permanecen azules. 

Tinción de Ziehl-Neelsen

Materiales: Mechero, Asa, Desinfectante, MicroscopioLaminilla y cubre-objeto, Bandeja para hacer tinción, colorante fucsina, Azul de metileno, agua, alcohol

La tinción de Ziehl-Nelsen es una técnica de tinción diferencial rápida, para identificar microorganismos patógenos.
Fue descrita por primera vez por dos médicos alemanes, Franz Ziehl, un bacteriólogo y Friedrich Neelsen, un patólogo.
También es una tinción diferencial. Se denomina tinción ácido-alcohol resistente y es específica para una serie de bacterias con estructura de pared particular, las micobacterias. La pared de las micobacterias no está basada en peptidoglicano como las bacterias gram positivas y gram negativas, sino en ácidos micólicos. Esta particularidad las hace resistentes a la decoloración con ácido y alcohol que no se produce en casi ningún otro tipo bacteriano.

la coloración clásica de la Ziehl-Neelsen requiere calentamiento para que el colorante atraviese la pared bacteriana que contiene ceras.
 Esta técnica puede utilizarse tanto en muestras histologicas como citologicas 
La tinción de Ziehl-Neelsen utiliza tres reactivos. El colorante primario es la fucsina que tiñe toda la preparación de rojo brillante. Como mordiente se utiliza flameado de la preparación con el colorante. La solución decolorante elimina el colorante primario excepto el los bacilos ácido alcohol resistentes. (BAAR). Por último el azul de metileno tiñe de azul el resto de la preparación.
Esta tinción es útil en la detección de bacterias del género Micobacterium en muestras de esputo. La presencia de bacilos rojos sobre fondo azul constituye un diagnóstico casi definitivo de tuberculosis.


Tinción hematoxilina-eosina

Materiales:  Mechero, Asa, Desinfectante, MicroscopioLaminilla y cubre-objeto, Bandeja para hacer tinción, formalina, parafina, alcohol, Xileno, eosina

La tinción hematoxilina-eosina corresponde a la mezcla de hematoxilina y eosina.
La tinción hematoxilina y eosina es uno de los métodos mas populares de tinción utilizado en histología y medicina diagnosticaEl método supone la aplicación de la tinción de hematoxilina, que por ser catiónica o básica, tiñe estructuras ácidas en tonos Azul y Púrpura,como por ejemplo los núcleos celulares;y el uso de eosina que tiñe componentes básicos en tonos de color rosa
gracias a su naturaleza aniónica o ácida, como el citoplasma

La tecnica de coloracion consiste en: la Fijación de la muestra con Formalina: Detiene el metabolismo y 
conserva la estructura del tejido. (proteínas pero no lípidos)
Lavado y deshidratación: Extracción de alcohol con Xileno, luego inclusión de la muestra con 
parafina fundida Coloracion con Eosina: deshidratación del corte con soluciones alcohólicas de 
concentración creciente,  y tincin con sololucion alcohólica de eosina. lavado con xileno.
La eosina es un colorante acido , por lo cual se asocia y colorea a estructuras catiónicas del 
citoplasma y matriz extracelular, tales como: filamentos citoplasmicos, 
membranas intracelulares y fibras extracelulares
La hematoxilina se asocia con mordientes para actuar como un colorante básico, 
por lo cual se asocia y colorea estructuras aniónicas




miércoles, 10 de agosto de 2011

Temas selectos de biología

Lo que yo espero de la clase de TSB es una clase llena de informacion divertida y novedosa.. encontrar mas motivacion y buenas razones para continuar estudiando ciencias, espero tener una buena relacion con mis compañeros y maestro, no solo busco obtener buenas calificaciones si no llenarme de mucha informacion que me serviran en un futuro para mis estudios. :D y terminar mi carrera! uju!
Pienso que la materia de temas selectos de biología es una materia interesante y creo que es algo pesada si no logro comprender... pero yo hare lo posible por ser la mejor! xD